Elektroforezy w żelu agarozowym jestmetoda używana do wizualizacji DNA oraz oddzielne fragmenty DNA wielkości. Elektroforeza wykorzystuje pole elektryczne , w celu oddzielenia cząsteczek naładowanych elektrycznie . Kwas dezoksyrybonukleinowy lub DNA , posiada ładunek ujemny ; dzięki temu możliwe jest wyciągnięcie elektroforetycznie cząsteczki kierunku dodatnio naładowanej słupa. Żelu agarozowym, służy jako środek , poprzez które migrują cząsteczki DNA , ponieważ są one rozdzielone przez elektroforezę . Ładowanie żelu
elektroforezy w żelu agarozowym oddziela cząsteczki DNA w oparciu o wielkości fragmentów znajdujących się w próbce. Małe otwory w górnej części żelu , zwane ” studnia „, są ładowane w cieczy zawierającej DNA, który ma być zbadany. Ten koniec żelu umieszcza się na anodzie lub ujemnie naładowany źródła energii elektrycznej .
Małe fragmenty
fragmenty DNA są przyciągane w kierunku katody lub dodatnio źródło elektryczne . Ponieważ cząsteczki migrują przez żel agarozowy , zaczynają rozdzielić według wielkości. Najmniejsze fragmenty DNA są te o najmniejszej masie cząsteczkowej ; te fragmenty sąnajszybszym migrować w kierunku końca katody żelu.
większe
< p> fragmenty DNA stają się coraz większe i mają większe ciężary cząsteczkowe , są one wolniej poruszać się w żelu agarozowym w kierunku katody ; w związku z tym największe fragmenty DNA znajduje się blisko końca anodą żelu , podczas gdy najmniejsza fragmentów DNA znalezionych w pobliżu końca katody.
Wizualizacja
DNA fragmenty mogą być wizualizowane pod źródłem promieniowania ultrafioletowego przez barwienie im specjalnej chemicznej nazwie bromek etydyny . Po ekspozycji na u.v. pojawi się światło , rozdrobnione DNA w formacji drabiny , z najcięższych i największych fragmentów DNA na szczycie drabiny i najlżejszych , najmniejszych fragmentów DNA na dole drabiny .